В верхней части трубки образовалась зеленая область. М.С. Цвет промыл колонку растворителем (бензол). Зеленый очищенный хлорофилл должен выйти на другом конце трубки.
Что такое хроматография? Типы и применения
Хроматография — это метод разделения и анализа смесей веществ, а также изучения физических и химических свойств веществ. С помощью этого физического метода химики могут внимательно наблюдать за органическими и неорганическими соединениями и выяснить, из чего они состоят.
Слово «хроматография» означает «чернильное письмо», но это ошибочное название, так как часто оно не включает бумагу, чернила, краску или письмо.
Метод был предложен в 1903 году Михаилом Семеновичем Цветом, выдающимся русским исследователем. Сначала М.С. Цвет назвал свой метод адсорбционным анализом (1903), и только три года спустя он назвал его хроматографическим методом (1906)1 .
М.С. Цветной использовал хроматографический метод для разделения растительных пигментов. Чтобы отделить хлорофиллы, Цвет заполнил стеклянную трубку (колонку) твердым адсорбентом (например, инулином) и нанес на верхний слой экстракт хлорофиллов в лигроине. Затем колонна промывается лигнином. Цвет писал — «Из нижнего конца воронки вытекает сначала бесцветная, затем желтая жидкость (каротин), а в поверхностных слоях инулиновой колонки появляется ярко-зеленое кольцо, на нижнем конце которого быстро формируется желтый контур.
При последующем прохождении через колонку чистого лигнин-инулина как зеленое, так и желтое кольца сильно расширяются и удлиняются вниз до определенного предела». «Как окрашенные лучи солнечного спектра, различные компоненты были выделены из пигментной смеси и могли быть в дальнейшем проанализированы количественно и качественно. 2 Результат разделения, т.е. последовательность различных цветовых полос Цвет называется хроматограммой. Цвет использовал более сотни различных адсорбентов для разделения пигментов, детально усовершенствовал технику разделения и предложил несколько типов оборудования для своего метода (хроматографы).
Через несколько десятилетий после открытия цвета ученые изобрели новые виды хроматографии, различные сорбенты и хроматографические техники. Общеизвестно, что одно из открытий нового вида хроматографии связано с нашей страной. В 1938 году в журнале «Pharmacia» была опубликована статья Н.А. Измайлова и М.С. Шрайбера «Хроматографический метод анализа капель и его применение в фармации» 3, которая заложила новое направление в анализе. 3, что привело к появлению нового направления в хроматографии — тонкослойной хроматографии.
Недавно появилось несколько докладов авторитетных российских химиков, согласно которым первые работы в области аналитической газовой хроматографии были выполнены практически параллельно с западными учеными в 1940-х годах советскими исследователями М.М. Сенявиным, Н.М. Тулькертаубом, А.А. Жуховицким и Д.А. Вяхиревым. Это была работа по разделению методом адсорбции газов, проведенная задолго до известной публикации А. Джеймса и Мартина в 1952 году, с которой официально начинается история газовой хроматографии. 4
По мнению экспертов, хроматография является одним из 20 выдающихся открытий прошлого века, которые больше всего изменили науку и по которым определялось состояние развития техники, промышленности и культуры в целом. Хотя по образованию и профессии Цвет был ботаником, результаты его открытий имеют такое огромное значение для всех естественных наук, что, например, Федерация европейских химических обществ причисляет Цвета к сотне выдающихся химиков прошлого, наряду с четырьмя другими русскими именами — Ломоносовым, Менделеевым, Бутлеровым и Семеновым. 5
Основы хроматографии
Хроматография — это, по сути, взаимодействие двух различных фаз. Химическое соединение в одном агрегатном состоянии (например, жидком или газообразном) выходит на поверхность другого вещества в другом агрегатном состоянии (например, твердого или жидкого).
Движущееся соединение называется подвижной фазой, а неподвижное вещество (которое вообще не движется) — стационарной фазой. Компоненты подвижной фазы разделяются при движении через неподвижную фазу. Затем химики могут проанализировать отдельные компоненты по одному.
4 разных типа хроматографии
Существуют различные типы хроматографии, каждый из которых имеет свой тип подвижной и неподвижной фазы. Хотя основной принцип остается неизменным, способ взаимодействия различных компонентов с подвижной и неподвижной фазами может отличаться в зависимости от используемого хроматографического метода.
Ниже приведен список основных типов хроматографии, который поможет вам понять суть процесса. Мы постарались объяснить их очень простыми словами.
Общие сведения о хроматографии
Хроматографические методы анализа основаны на циклических процессах абсорбции-поглощения, происходящих между подвижной фазой (элюентом), содержащей растворенный образец, и твердым поглощающим материалом. Компоненты композитных смесей обладают различной абсорбционной способностью и поглощаются с разной скоростью и в разных количествах при прохождении через стационарную фазу. Путем последующего изучения результатов и сравнения их с эталоном можно определить точный состав реагента.
В традиционном методе в качестве статической фазы используется материал с развитой поверхностью, а элюентом является поток инертного газа или жидкости. Фильтрация раствора через слой поглощающего материала вызывает повторение абсорбции и десорбции, что отличает хроматографические методы анализа от других аналитических методик и определяет их эффективность.
Качественный и количественный анализ
Хроматографические методы анализа определяют качественный и количественный состав вещества. Качественные тесты идентифицируют образец по его хроматограмме и сравнивают его с эталонным значением, хранящимся в библиотеке данных.
Метод количественного анализа основан на измерении пиков, вызванных концентрацией примесей. Техник проверяет хроматограмму, используя один из следующих методов:
- Метод абсолютной градуировки. Зависимость параметров пика от концентрации разных веществ определяется экспериментально. Затем составляются графики и таблицы, с которыми в последующем и сравнивается хроматограмма. Благодаря простоте и высокой точности, метод является основным для выявления микропримесей.
- Метод внутренней нормализации. Сумма выбранных пиковых параметров (например, их высота или площадь) принимается за 100%. Далее рассчитывается отношение высоты отдельного изучаемого пика к суммарному значению, благодаря чему определяется массовая доля конкретного компонента в пробе.
- Метод внутреннего стандарта. В смесь вводится стандартное вещество, для которого заранее известен калибровочный график. Затем пики изучаемых компонентов сравниваются с пиками «стандарта». Метод применяют в случае исследования составов с переменным, но известным количеством анализируемых компонентов.
Методы постоянно дорабатываются и совершенствуются и позволяют получать более точные данные при анализе сложных смесей и сглаживать шумы на хроматограммах.
История возникновения метода
Хроматография была впервые описана русским ученым Михаилом Цветом, который исследовал структуру хлорофилла. Ботаник предположил, что зеленый пигмент состоит из нескольких отдельных компонентов, и ему понадобился метод, позволяющий разложить вещество на составные части. Он пропустил экстракт хлорофилла через стеклянную колонку, заполненную измельченным мелом. Промыв поглощающий материал эфиром, ученый получил несколько полос разного цвета и таким образом смог подтвердить состав образца из нескольких компонентов. Разработанный метод был назван хроматографией.
Цвет описал принцип хроматографии следующим образом: Вещество в подвижной фазе постоянно реагирует с новыми участками адсорбирующего материала и частично поглощается, но адсорбированные компоненты «смываются» новыми порциями поступающего элюента. Другими словами, ученый открыл только один способ взаимодействия между разделяемыми компонентами: молекулярную адсорбцию.
Поэтому ботаник ошибочно предположил, что разница в адсорбции отдельных компонентов является самым важным требованием для хроматографического анализа. Однако современная хроматография использует для изучения сложных смесей физические и химические явления, отличные от молекулярной адсорбции. В результате появилось множество хроматографических методов, и для их различения была разработана общепринятая классификация.
Основные виды хроматографии:
Все методы хроматографического анализа имеют общие характеристики:
Проведение хроматографического анализа включает в себя несколько этапов:
Разделяемые вещества обладают хроматографическим свойством — временем удерживания TR(время нахождения соединения в колонке от загрузки до выхода (когда достигается максимальная концентрация тестовых фракций)) или Rf(отношение пути, пройденного соединением, к пути, пройденному растворителем) для бумажной или тонкослойной хроматографии.
Источники и литература:
- Жуховицкий А.А., Туркельтауб Н.М. Газовая хроматография. М.: Гостоптехиздат, 1962, 240 с.;
- Сакодынский К.И., Киселев А.В., Иогансен А.В. и др. Физико-химическое применение газовой хроматографии. М.: Химия, 1973, 254 с.;
- Жидкостная колоночная хроматография. В 3 т. Под ред. З.Дейла, К.Мацека, Я.Янака. М.: Мир, 1972;
- Березкин В.Г., Алишоев В.Р., Немировская И.Б. Газовая хроматография в химии полимеров. М.: Наука, 1972, 287 с.;
- Морозов А.А. Хроматография в неорганическом анализе. М.: Высш. шк., 1972, 233 с.;
- Березкин В.Г., Бочков А.С. Количественная тонкослойная хроматография. М.: Наука, 1980, 183 с.;
- Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам. В 2 т. Под ред. О.Микеш. М.: Мир, 1982, т. 1–2, 783 с.;
- Хроматографический анализ окружающей среды. Под ред. Р.Гроба. М.: Мир, 1979, 606 с.;
- Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография. В 2 т. М.: Мир, 1981, т. 1, 615 с., т. 2, 523 с.;
- Экстракционная хроматография. Под ред. Т.Браун, Г.Герсини. М.: Мир, 1978, 627 с.
Подробности Опубликовано 14 Сентябрь 2013 Автор: Administrator
Колоночная хроматография
Колоночная хроматография — это метод препаративного разделения смесей жидких или твердых веществ, основанный на различном сродстве разделяемых веществ к неподвижной (абсорбент) и подвижной (элюент) фазам. В целом, чем лучше вещество адсорбируется на неподвижной фазе, тем медленнее оно покидает колонку.
Смеси твердых или жидких веществ с различным Rf(или тR) Пример: Разделение смеси различных компонентов с разностью Rf не менее ~0.15.
Отделение целевого вещества от неабсорбирующих примесей. Пример: Отделение целевого вещества от неорганических примесей или примесей с Rf ~0.
Виды хроматографического анализа
Интенсивные исследования методов дифференциации смесей привели к появлению разнообразных хроматографических методик. Все методы можно разделить на группы в соответствии с их характеристиками:
- агрегатное состояние подвижной/стационарной фаз;
- техника протекания процесса;
- механизм разделения/определения соединений;
- способ получения данных анализа;
- задачи хроматографического исследования.
Давайте рассмотрим каждую классификацию и тип хроматографического анализа подробнее.
Классификация на основе агрегатного состояния поглощающего растворителя
Как упоминалось ранее, подвижные/неподвижные фазы — это жидкие и газообразные носители. Можно предположить, что хроматографически различают также газообразные и жидкие вещества. Каждый тип далее подразделяется на подгруппы.
Газовая хроматография (ГХ) анализирует летучие, термически устойчивые смеси. Этими свойствами обладают около 5 % обнаруженных органических соединений, но на их долю приходится около 80 % соединений, используемых в производстве и повседневной жизни.
Растворителем здесь является инертный газ. Он проходит через абсорбирующий материал с большой площадью поверхности. Подходящими газами-носителями являются водород, гелий, азот, аргон и двуокись углерода. Из-за высокого риска и высокой стоимости они используются редко, поэтому азот является наиболее часто используемым газообразным носителем для GC. Газ-носитель «проносит» молекулы образца через колонку. В этом случае он не обменивается молекулами с сорбентом или сорбирующим материалом.
В зависимости от состояния агрегации неподвижной фазы, ГХ
- газожидкостная — в роли стационарной фазы выступает жидкость, которая наносится на инертный носитель;
- газоадсорбционная (газотвердофазная) — в качестве сорбента выступают твердые составы с удельной поверхностью 10-100 м²/г (активный уголь, силикагели, пористое стекло, оксид алюминия).
вещества разделяются при разных температурах. Выделенные в газовом потоке компоненты направляются в детекторы. Детекторы регистрируют изменения во времени, и получается хроматограмма. Преимущества метода заключаются в том, что он позволяет проводить быстрый анализ, имеет широкий спектр применения и позволяет определить состав образца с высокой точностью.
Жидкостная хроматография (ЖХ) используется для различения нелетучих соединений, которые присутствуют в растворах в виде молекул и ионов. Впервые этот метод был использован М.С. Цветом для очистки хлорофилла. Этот метод позволяет разделять более широкий спектр смесей, чем газовая сепарация. Это связано с тем, что большинство веществ нелетучи и не стабильны при высоких температурах.
Жидкая подвижная фаза является активным элюентом (носителем). Частицы элюента могут быть сконцентрированы в абсорбенте таким образом, чтобы молекулы исследуемого вещества вытесняли молекулы жидкости при прохождении через трубку. Используя различные вещества, можно варьировать удерживание и селективность системы.
Подвижная фаза может находиться в любом агрегатном состоянии, поэтому существуют следующие типы АЭ:
- жидкостно-жидкостная — определение компонентов осуществляется на основании разной степени растворимости в системе фаз;
- жидкостно-твердофазная — дифференциация осуществляется за счет разной адсорбации и десорбации (т.е. за счет разной концентрированности молекул и разной силы взаимодействия с сорбентом);
- жидкостно-гелевая — в основе принципа лежит способность полимерных молекул разных размеров проникать внутрь гелевых зерен, которые образованы из полимерных сеток.
Преимущества и недостатки хроматографического анализа
С появлением хроматографии стало возможным разделять органические и неорганические соединения, отделять примеси, концентрировать вещества в разбавленных растворах и проводить качественные и количественные исследования. На этом преимущества не заканчиваются. Преимущества метода заключаются в следующем:
- высокая эффективность дифференциации за счет динамического характера процесса и его многократности;
- в процессе используются разные виды взаимодействия подвижной и неподвижной фаз;
- на разделяемые компоненты можно накладывать гравитационные, магнитные, электрические поля, что дает возможность для более глубокого изучения;
- объединяет в себе разделение и определение нескольких элементов;
- процесс разделения происходит здесь и сейчас.
Недостатком является то, что некоторые методы требуют больше времени на реализацию. Особенно при различении веществ с похожими свойствами. Кроме того, метод требует тщательной подготовки, соблюдения эталонных условий и дорогостоящего оборудования.
Как осуществляется хроматографическое разделение?
Хроматографический анализ проводится с помощью специального прибора — хроматографа. Современные устройства оснащены микропроцессорами и оборудованием для автоматической обработки данных. Основным компонентом хроматографа является колонка, изготовленная из металла, пластика или стекла.
Количественные показатели вещества регистрируются с помощью детекторов:
- по теплопроводности — принцип основан на разнице в теплопроводности на входе и выходе из колонки;
- пламенно-ионизационный — используется для определения примесей органического происхождения за счет изменения электрической проводимости;
- пламенно-фотометрический — применяется чаще всего при исследовании соединений фосфора, серы, азота, в редких случаях — ртути на основании излучения частиц вещества при попадании в кислородно-водородное пламя;
- термоионый — применяется для определения фосфора или азота с помощью шарика из керамики и солей щелочного металла;
- электрозахватный — используется источник электронов, которые взаимодействуют с молекулами газа, образуя измеряемый ток;
- электрохимический — фиксируют реакции серосодержащих веществ на поверхности электролита.
Приборы с несколькими колонками, различными детекторами и механизмами автоматической подачи образца становятся все более распространенными. Хроматограф подключен к компьютеру, который содержит базу данных хроматографии.
Качественный анализ в хроматографии
Качественный анализ образца проводится с помощью хроматографа, который измеряет и записывает характеристики и строит график. Полученную хроматограмму исследуют, рассчитывают по формулам, закону Генри и уравнению Ван Демтера, сравнивают с эталонными калибровками и записывают.
Необработанные графические данные, на которых основывается качественный анализ, называются характеристиками (параметрами) элюирования. К ним относятся:
- время удерживания (activity, активности);
- ширина и высота элюционной кривой;
- ширина зоны на слое;
- удерживаемый объем;
- индекс удерживания;
- эффективность (число тарелок);
- селективность.
Методики постоянно совершенствуются и уточняются — на основе результатов тестирования разрабатываются специальные таблицы, предоставляющие более точные данные для качественных исследований.
Где применяется хроматография
Впервые этот метод был использован в биологии первооткрывателем М. С. Цветом. Сегодня он используется практически во всех областях — промышленности, медицине, экологии, криминалистике и фармации.
Хроматография в биологии
Хроматография в биологии используется сегодня каждый день. Наиболее важным методом хроматографии в биологии является газовая хроматография. Он используется для мониторинга пестицидов в почве, загрязняющих веществ в воде и в воздухе. LC/MS/MS, сочетание жидкостной хроматографии, тандемной масс-спектрометрии и центрифугирования, используется в протеомике для разложения липидов, белков и углеводов на простые компоненты для дальнейшего исследования.
Хроматография в химии
Хроматография является одним из наиболее важных методов в химии для получения точных и надежных данных. IUPAC (Международный союз теоретической и прикладной химии) участвует в разработке стандартов для определения хроматографических методов.
Для исследования свойств анаэробных и аэробных веществ и выделения нужного продукта из смеси используются различные методы. Каждая компания в химической промышленности использует хроматографические методы на этапе контроля качества сырья и других технологических процессов.
Хроматография в медицине
В клинической медицине эти методы используются в тесной связи с биологией. Исследование беременности, хромосом, лечение различных микробных инфекций, патологий, отравлений проводится без применения антибиотиков и сывороток, на основе принципов жидкостной хроматографии, где твердая фаза — адсорбент, жидкость — кровь, плазма, лимфа, а отдельная смесь — внутренние жидкости с метаболитами токсинов.
Хроматография в криминалистике
Методы криминалистической хроматографии предполагают решение государственных задач путем проведения исследований в следующих областях:
- поиск и идентификация отпечатков пальцев тела;
- медико-биологический анализ ДНК для идентификации личности человека;
- аппаратурное определение состава ядов, наркотиков, взрывчатых веществ;
- анализ состава чернил, бумаги, алкоголя.
В криминалистике широко используются два варианта жидкостного метода: хроматография на тонких слоях абсорбирующего материала и хроматография на бумаге.
Хроматография в цитологии
В цитологии метод используется для изучения структуры клеток in vivo («в естественных условиях»).
Хроматография нефти
На нефтеперерабатывающих заводах хроматографический метод используется для определения физических свойств нефти (теплопроводность, плотность) и содержания серосодержащих примесей. Это напрямую влияет на качество таких продуктов, как бензин, топливо и трансформаторное масло.
Хроматография в фармации
В фармацевтической промышленности хроматографические методы используются в различных науках: фармакопее (лат. Pharmacopoeia), фармацевтике и фармакогнозии. В фармакопейном анализе широко используются ионообменная формула и спектрометрический метод, с помощью которых можно за короткое время выделить из смеси мельчайшие части. В косметологии метилпропансульфоновая кислота, полученная препаративным методом, используется в средствах по уходу за волосами.
Селективность в хроматографии
Избирательность — это свойство объекта адаптировать свойства другого объекта во взаимодействии к своим потребностям для решения задачи.
В хроматографии это называется селективностью колонки, и чем она выше, тем лучших результатов можно достичь. Выбор сорбента, состав растворителя, химическая структура и свойства компонентов смеси, а также температура колонки являются факторами, варьирование которых позволяет довести селективность до высокого уровня.
Как проводиться хроматография?
В хроматографии смесь, осажденная в неподвижной фазе, разделяется на группы веществ подвижной фазой — элюентом. Это связано с разной скоростью движения веществ.
Наиболее важным шагом в хроматографическом анализе является подготовка условий, поскольку каждая смесь обладает своими уникальными свойствами. Например, если условия не соответствуют требованиям, это может привести к получению неразделенной смеси или к тому, что отдельные соединения не удастся разделить. Однако целью анализа может быть выделение одного соединения. Например, оценка концентрации гемоглобина в крови не требует данных обо всех других составляющих.
Для каждой цели подбираются специальные смеси для выделения нужных веществ. В зависимости от условий степень разделения может быть разной. Библиотечные данные предоставляют информацию о поведении веществ в конкретных средах в виде константы Rf (коэффициент удерживания). Она представляет собой отношение расстояния, пройденного веществом или растворителем.
Для упрощения получения результатов можно заменить как стационарную, так и подвижную фазу. Неподвижная фаза состоит из бумаги, пластин силикагеля или других абсорбирующих материалов. В него загружается анализируемая смесь проб, которая захватывается движущимся элюентом. Элюент, в свою очередь, движется через материал под действием капиллярных сил.
Стандартными материалами для твердо-жидкостной хроматографии являются либо бумажные пластины, либо пластины с силиконовым гелем. При необходимости бумага может быть модифицирована, например, путем ацетилирования. Это делает материал липообразным, что позволяет разделять смесь энантиомеров.
В тонкослойной хроматографии также используются модификации сорбента, такие как этерификация, взаимодействие с хлорсиланом и введение алкильных групп. Модифицированные пластины позволяют более эффективно разделять смеси и делают их селективными по определенным свойствам.
Полученные пики интенсивности называются сигналами. Соотнося полученные сигналы со значениями из библиотеки или с внутренним стандартом, сигналы ассоциируются с веществами. По интенсивности сигналов можно определить концентрацию компонентов.
Бумажная хроматография
Хроматография на бумаге является одной из форм ЖХ. Он отличается от других методов материалом твердой фазы — целлюлозой. В стандартизированной или модифицированной форме он служит в качестве абсорбирующего материала.
Принцип бумажной хроматографии аналогичен принципу TLC: смесь образцов наносится на бумагу, помещается в герметичный контейнер и погружается в растворитель с одного конца. Под действием капиллярных сил образец захватывается и перемещается из начальной точки движущимся растворителем. Когда раствор достигает конца листа, его удаляют и сушат. Для выделения полученных пиков интенсивности могут потребоваться дополнительные операции, например, погружение в фосфорную кислоту. Соотношение расстояния, пройденного веществами и растворителем, дает значение коэффициента удерживания Rf. Он зависит от бумаги, растворителя и самих веществ.
Высокая чувствительность делает его полезным инструментом в биохимии, где вес образца измеряется в микрограммах. Бумажная хроматография используется для идентификации интересующих белков путем анализа их на наличие мутаций. После деградации протеиназами из белков получаются пептиды, хроматограммы которых специфичны для различных белков.
Метод выявляет различия в белках, начиная с одной аминокислоты, и поэтому очень востребован при поиске мутаций. Он также позволяет отмечать сродство белков с похожими хроматограммами. Это полезно для выявления метаболических путей. Например, если вы выделите схожий состав двух белков, вы можете предположить, что один из них образовался путем добавления или удаления строительных блоков из другого.
Хотя этот метод был открыт более века назад, он до сих пор пользуется большим спросом. Благодаря постоянным усовершенствованиям он позволяет разделять и анализировать необходимые смеси. Применение во всех областях человеческой жизни — это простота, скорость и низкая стоимость.
Для анализа можно использовать автоматические хроматографы, позволяющие анализировать смеси с высокой точностью в течение нескольких часов. Автоматизация также позволила удешевить, казалось бы, сложные анализы в медицине.
Однако ручная хроматография не менее информативна и полезна, если у вас есть соответствующие навыки. Колоночная хроматография позволяет разделять смеси и определять их состав.
Хроматографический спектрометр: Принцип работы
Масс-хроматография — это гибридный метод.
Применение газовых и жидкостных хроматографов
Газовые и жидкостные хроматографы активно…
Общие причины отказа хроматографа
Газовый хроматограф — это сложный аналитический прибор.
Почему выпускной важен. Теория. Хроматограф…
Детекторы газовых хроматографов
Общие характеристики детекторов Хроматографический детектор…
Хроматографы, используемые в России…
Хлорорганические соединения (ХОС) в нефти и реагентах
Вопрос контроля содержания КОС в…
Хроматография в медицине
Хроматография активно используется в медицине….
Генераторы азота и их применение
В газовой хроматографии азот является…
Газовые хроматографы: Строительство и эксплуатация.
Каждый газовый хроматограф состоит по меньшей мере из…
ГХ или ВЭЖХ? Какой из них выбрать?
Когда возникает новая аналитическая задача, …
Хроматография. Проще говоря.
О хроматографии написано много. Мы …
Как осуществляется хроматография?
Хроматографический анализ — это…
Абсорбционная спектрометрия существует уже более века…..
Исследовательская часть проекта
Анализ пигментов с помощью бумажной хроматографии
Материалы и оборудование:
Листья крапивы или шпината Гомогенизатор или нож.
90% ацетон Скребок и раствор
Небольшой отрезок капиллярной трубки Воронка
Лабораторная пробирка Лабораторная пробирка Кнопка клерка
Процесс, обеспечивающий поступление органических веществ, — это фотосинтез. Фотосинтез — это преобразование энергии солнечного света в энергию связи других химических веществ, особенно углеводов. Наиболее важными поглотителями световой энергии являются пигменты фотосинтеза: хлорофиллы, ксантофиллы.
Таким образом, соотношение различных фотосинтетических пигментов отражает эффективность фотосинтеза.
Мы взяли зеленые части растения и измельчили их сначала ножницами, а затем пестиком в ступке. Полученную суспензию смешивали со спиртом, хорошо перемешивали и фильтровали через фильтровальную бумагу, помещенную в воронку. Полученный темно-зеленый раствор представляет собой экстракт смеси хлорофиллов. Смесь пигментов выделяется.
Пигменты распределяются в следующем порядке: желто-зеленый хлорофилл b адсорбируется первым снизу, за ним следует сине-зеленая полоса хлорофилла a, ксантофилл выше, каротин движется очень быстро и находится на вершине полосы хроматографической бумаги вблизи фронта растворителя.
Разделение цветных чернил на составляющие компоненты
Материалы и оборудование:
Проведение эксперимента:
Прикрепите прямоугольный лист бумаги для рисования к пробке с помощью кнопки. Проведите линию на расстоянии около 1 см от края фломастером. Затем подвесьте бумагу в пробирке так, чтобы линия старта находилась близко к поверхности растворителя, а кончик бумаги был погружен в растворитель (дистиллированную воду). Хроматографию продолжают до тех пор, пока фронт растворителя не окажется на расстоянии 1 см от верха бумаги. Затем хроматограмму снимали, высушивали и наблюдали результат.
Процесс отличается в трех случаях, поскольку разные сорта содержат разное количество красителя.
Разделение индикаторов.
Материалы и оборудование:
Бутылка с аммиаком
Чашка Петри Пипетка
Нанесите каплю защищенного метилового оранжевого на середину хроматографической бумаги. Высушите бумагу, потряхивая ее на воздухе, слегка подержите ее над открытой бутылкой с аммиаком, а затем поместите в чашку Петри. На место наклейки капнула одна капля воды.
Два маркера, содержащиеся в растворе метилового оранжевого, движутся с разной скоростью во время центрифугирования, причем синее кольцо движется быстрее, чем желтое. Синее кольцо — синий индикатор для бромотимола, а желтое кольцо — оранжевый индикатор для метила.
Заключение:В заключение следует отметить, что в ходе проекта была проверена эффективность хроматографического метода с использованием теоретического материала и 3 экспериментов.
Литература:
Столяров Б.В., Савинов И.М., Витенберг А.Г. и др./Практическая газовая и жидкостная хроматография. Год публикации: 2002
2002:
Руководитель проекта: Елена Сухилина
Автор проекта: Мария Сарматина
